品牌 | Cygnus Technologies | 供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
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應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè) | | |
產(chǎn)品名稱:Cygnus F410 大腸桿菌宿主細胞ELISA檢測試劑盒
產(chǎn)品貨號:F410(96T/盒)
保存溫度:2~8℃
現(xiàn)貨供應 *
Cygnus E.coli HCP ELISA Kit 試劑盒 產(chǎn)品介紹:
Cygnus F410 E.coli HCP 大腸桿菌宿主細胞ELISA檢測試劑盒主要設計用于檢測產(chǎn)物重組表達過程中大腸桿菌宿主細胞污染,試劑盒使用的多克隆抗體對數(shù)百種HCPs具有反應性。 Cygnus F410 E.coli HCP 大腸桿菌宿主細胞ELISA檢測試劑盒檢測低濃度可達到 0.2ng/mL。
ELISA檢測相比Western Blot:Western Blots檢測過程復雜并需借助程序分析結(jié)果。而且,Western Blot本質(zhì)上是定性分析,不能得到定量結(jié)果,檢測靈敏性也受到樣本體積的限制。Western Blot在下游純化過程中檢測產(chǎn)物HCPs缺乏靈敏度和特異性。而微量滴定板ELISA檢測可以克服上述限制。ELISA具備高度靈敏性,可獲得半定量結(jié) 果,是純化工藝,過程控制,常規(guī)質(zhì)量檢測的佳選擇。
產(chǎn)品使用時一定要做好保護措施:0.5M硫磺酸有強腐蝕性,要避免接觸眼睛、皮膚和衣物。檢測前所有試劑都要平衡到室溫。
Cygnus E.coli HCP ELISA Kit 試劑盒 檢測原理:
大腸桿菌E. coli檢測是一個雙位點酶聯(lián)免疫檢測。樣本中包含的E. coli HCPs蛋白與標記有抗-E. coli 抗體的辣根過氧化物酶同時反應,反應發(fā)生在之前涂有一層吸附性抗-E. coli 蛋白抗體的微量滴定板中進行。免疫反應構(gòu)成為夾層式結(jié)構(gòu):固相抗休-HCP-酶標記抗體。反應結(jié)束后清洗微量滴定板去除未結(jié)合反應物。添加TMB作用底物 反應。微量滴定板讀數(shù)器上測定水解物濃度,水解物濃度與E. coli HCPs蛋白濃度成比例。用提供的標準液繪制標準曲線,根據(jù)讀數(shù)可以計算出E. coli HCPs蛋白含量。
檢測試劑盒 檢測過程:
取出所有試劑平衡到室溫→分別移取25µl Cygnus F410 大腸桿菌宿主細胞ELISA檢測試劑盒標準液,對照物和樣品至待測孔→移取100µl anti-E. coli:HRP(#F411)至每孔→密封滴定板,搖床室溫溫育90分鐘,180rpm→清空小孔,用紙吸干殘留液,350µl清洗緩沖液清洗4次→加 100µl TMB 作用物(#F005)→室溫靜置30分鐘,不需搖床→加100µl反應終止液(#F006)→分光光度計450/650nm讀數(shù)
檢測結(jié)果分析:
Cygnus F410 E.coli HCP ELISA Kit 標準液(0, 1, 3, 12, 40, 100ng/mL)可用于制作標準曲線,標準液濃度相當于免疫反應HCP總濃度。根據(jù)測定的小孔中標準液吸光值繪制標準曲線。Cygnus F410 E.coli HCP ELISA Kit 檢測結(jié)果數(shù)據(jù)分析可以使用計算機選配曲線,例如點到點,三次樣本函數(shù),或四參數(shù)邏輯曲線。不要使用線性回歸分析修改樣品吸光值,這樣會出現(xiàn)顯著誤差。也可以手工繪圖,Y軸標注吸光值,X軸標注濃度。然后根據(jù)樣品吸光值計算出樣品中HCP濃度。(操作時每一濃度標準液都要滴定到兩個小孔中,以便計算平均分光光度值,樣品也需計算平均吸光值)。
組成成份:
● Anti- E. coli:HRP(辣根過氧化物酶標記) 1x12mL F411(Product#)
● Anti- E. coli coated微量滴定板 12x8孔 F412
● E. coli HCP標準液(0, 1, 3, 12, 40, 100ng/mL) 1mL/瓶 F413
● Stop Solution終止液(0.5M硫磺酸) 1x12mL F006
● TMB (3,3’,5,5’-四甲基聯(lián)苯氨) 1x12mL F005
● Wash Concentrate清洗物(20倍濃縮) 1x50mL F004
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